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      正相和反相色譜柱的區別

      點擊次數:1608   發布時間:2021/7/20 9:51:58

                                                             正相和反相色譜柱的區別

                                                                  圣賓儀器科技上海有限公司

      在正相色譜中,一般采用性鍵合固定相,硅膠表面鍵合的是性的有機基團,鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。常用的有氰基(-CN)、氨基(-NH2)、二醇基(DIOL)鍵合相。流動相一般用比鍵合相性小的非性或弱性有機溶劑,如烴類溶劑,或其中加入一定量的性溶劑(如lu仿、醇、乙腈等),以調節流動相的洗脫強度。通常用于分離性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值,隨其性的增加而增大,但隨流動相中性調節劑的性增大(或濃度增大)而降低。同時,性鍵合相的性越大,組分的保留值越大。該法主要用于分離異構體,性不同的化合物,特別是用來分離不同類型的化合物。

      在反相色譜中,一般采用非性鍵合固定相,如硅膠-C18H37(簡稱ODSC18)硅膠-苯基等,用強性的溶劑為流動相,如甲醇/水,乙腈/水,水和無機鹽的緩沖液等。

      正相色譜和反相色譜的區別:

      本質上是填料(固定相)的不同,正相色譜柱填料性強,洗脫順序由弱到強;反相色譜柱填料性弱,洗脫順序由強到弱。

        1、正相色譜

      正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica)以及其他具有性官能團胺基團,如(NH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他性基團性較強,因此,分離的次序是依據樣品中各組分的性大小,即性較弱的組份zui被沖洗chu譜柱。正相色譜使用的流動相性相對比固定相低,如正已烷(Hexane),lu放fang(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

        2、反相色譜

       反相色譜用的填料常是以硅膠為基質,表面鍵合有性相對較弱官能團的鍵合相。反相色譜所使用的流動相性較強,通常為水、緩沖液與甲醇、乙腈等的混合物。樣品流出se譜柱的順序是性較強的組分zuixian被沖洗出,而性弱的組分會在色譜柱上有更強的保留。

      常用的反相填料有:C18(ODS)、C8(MOS)、C4(Butyl)、C6H5(Phenyl)等。

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      原創作者:圣賓儀器科技(上海)有限公司

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